亚洲无码不卡永久免费,亚洲无码精品在线播放,国产在线精品第一区二区,日本高清一区二区三区欧美

您好!歡迎訪問優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司網(wǎng)站!
全國服務(wù)咨詢熱線:

15021281375

當前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 科研試劑盒 > PCR試劑盒 > 乙型肝炎病毒通用型染料法PCR試劑盒

乙型肝炎病毒通用型染料法PCR試劑盒

簡要描述:乙型肝炎病毒通用型染料法PCR試劑盒乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)會引起乙型病毒性肝炎,是一種以肝臟病變?yōu)橹鞯膫魅静 ?/p>

  • 更新時間:2024-07-17
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問  量:256

詳細介紹

品牌YLKBIO貨號YLK10372P
規(guī)格50T供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研實驗應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)
英文名稱Hepatitis B Virus(HBV) SYBR qPCR Kit保存條件低溫運輸,-20℃保存
有效期12個月試劑盒說明不同批號的試劑盒組分不可交互使用

乙型肝炎病毒通用型染料法PCR試劑盒


商品名稱:乙型肝炎病毒通用型染料法PCR試劑盒

Name     :Hepatitis B Virus(HBV) SYBR qPCR Kit

乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)會引起乙型病毒性肝炎,是一種以肝臟病變?yōu)橹鞯膫魅静?。臨床上以食欲減退、上腹部不適、肝區(qū)痛、乏力為主要表現(xiàn)。部分患者可有黃疸發(fā)熱和肝大伴有肝功能損害,有些患者可慢性化,甚至發(fā)展成肝硬化,少數(shù)可發(fā)展為肝癌,對人體生命健康造成嚴重損害,因此乙型肝炎病毒通用型的快速準確鑒定對該病的預防和檢疫有著重要作用,為此本公司開發(fā)了簡單快捷的乙型肝炎病毒通用型染料法熒光定量PCR檢測試劑盒,它具有下列特點:

1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)乙型肝炎病毒通用型保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。

4.  一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。

5.  本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。

6.  本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。


【試劑組成】

成分

十孔盒包裝

2×qPCR MagicMix

500μL(棕色管)

熒光PCR專用模板稀釋液

1 mL(黃蓋)

乙型肝炎病毒通用型PCR引物混合物

100μL(白蓋)

乙型肝炎病毒通用型PCR陽性對照

(10E8 拷貝/μL)

50μL(紅蓋)

DNA病毒裂解液(試用裝)

15次(9 mL

使用手冊

1

【儲存條件及有效期】

低溫運輸、-20℃保存,有效期一年。


【自備試劑】DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。


【使用方法】

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL610倍稀釋度為例)

注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA

1.       片段作為陽性對照。

2.      標記6個離心管,分別為76,5,4,3,2。

3.      用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。

4.      7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5.      換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6.      換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7.      重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8.       如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?span>10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為10E4 拷貝/μL10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PCNC的體積也必須是200μL。

9.      用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA/提取試劑盒兼容。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)

10.      如果只做1次重復,則標記N+9PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加23倍。

11.      在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后最后加):

成分

樣品管

N+2

PCR陰性對照管

PCR陽性

對照管(2-7管)

2×qPCR MagicMix

(棕色管)

10 μL

10 μL

10 μL

乙型肝炎病毒通用型PCR

引物混合液(白蓋)

2 μL

2 μL

2 μL

自備10×ROX (見注)

2 μL

2 μL

2 μL

 N+2待測樣品DNA模板

6 μL

不加

不加

7步所得PCR陽性對照

稀釋液(2-7號)

不加

不加

6μL2號樣到2號管,3號樣到3號管

:ABI750077007900儀器需要使用ROX作為對照,其他熒光PCR儀器(如iCycler IQMJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000LightCycler480)不需要使用ROX,則用水替代。

12.       蓋上蓋子后上機,按下面參數(shù)進行PCR(具體PCR參數(shù)可以根據(jù)儀器不同而自行優(yōu)化)。

過程

溫度

時間

預變性

92℃

5分鐘

PCR反應(yīng)

30個循環(huán))

92℃

60

54

60

72

60




13.數(shù)據(jù)采集

具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA時,最大吸收光譜在471 nm,結(jié)合DNA時的最大吸收光譜在500 nm,最大發(fā)射光譜在530 nm。信號采集可以設(shè)置在復性或延伸步驟。

四、數(shù)據(jù)處理

14.       如果把本試劑盒用于定量檢測,則以陽性對照濃度的log值為橫軸,以Ct值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品的Ct值從標準曲線上推算出樣品DNA濃度的log值,再推算出其濃度。

       15.     如果把本試劑盒用于定性檢測,只判斷陽性或陰性,則陰性對照Ct必須大于或等于40。陽性對照必須有熒光對數(shù)增長,有典型擴增曲線,Ct值應(yīng)該小于或等于30。對待測樣品,如果其Ct大于或等于40則為陰性,如果小于或等于35則為陽性。如果在35-40之間,則重復一次。重復實驗的Ct值如果大于或等于40則為陰性,如果小于40,則為陽性。

產(chǎn)品咨詢

留言框

  • 產(chǎn)品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯(lián)系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細地址:

  • 補充說明:

  • 驗證碼:

    請輸入計算結(jié)果(填寫阿拉伯數(shù)字),如:三加四=7
優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司
地址:金大公路8218號1幢
郵箱:1431486511@qq.com
傳真:
關(guān)注我們
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號了解更多信息:
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號
了解更多信息
墨竹工卡县| 福建省| 个旧市| 偏关县| 临邑县| 荔波县| 姜堰市| 和林格尔县| 化隆| 镇雄县| 漳平市| 西林县| 平南县| 米泉市| 克拉玛依市| 郴州市| 陆河县| 尚志市| 射洪县| 社旗县| 鹿泉市| 墨竹工卡县| 资阳市| 丹阳市| 东兴市| 互助| 海伦市| 鹤庆县| 鸡东县| 宿松县| 钦州市| 龙山县| 汉川市| 新泰市| 陈巴尔虎旗| 颍上县| 图们市| 那坡县| 泰州市| 玛多县| 新昌县|