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中性、堿性土壤速效磷試劑盒說明書

發(fā)布時(shí)間:2023/10/13      點(diǎn)擊次數(shù):270

中性、堿性土壤速效磷試劑盒說明書

   微量法100T/96S

 

測定意義

速效磷是土壤中可被植物吸收的磷組分,包括全部水溶性磷、部分吸附態(tài)磷及有機(jī)態(tài)磷,土壤中速效磷是限制植物生長主要因子之一。

 

測定原理

用弱堿性提取堿溶性磷和吸附態(tài)磷,用鉬銻抗比色法測定。

 

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀。

 

試劑組成和配制

提取液:液體105mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體6mL×1支,4℃保存。

試劑二: 粉劑×1支,4℃避光保存。臨用前加2mL蒸餾水溶解。用不完的試劑4℃保存。

試劑三: 粉劑×3支,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解。現(xiàn)配現(xiàn)用。

 

樣本處理

新鮮土樣風(fēng)干,過30-50目篩,按照土壤質(zhì)量(g):提取液體積(mL)120的比例(建議稱取約0.05g土樣,加入1mL提取液),振蕩提取1h,10000g ,25℃離心10min,取上清 液待測。

 

測定步驟

1、   取試劑三一支,加入1mL蒸餾水充分溶解待用。

2、   顯色液的配制(可測50個(gè)樣):取EP管一支,加入660μL試劑一,再加入100μL試劑二,充分混勻后,再加入240μL試劑三,充分混勻待用;配好的顯色液應(yīng)為黃色,若變藍(lán)則為磷污染;顯色液必須現(xiàn)配現(xiàn)用;若一次性測不了50個(gè)樣,可按比例縮小各試劑體積。

3、   操作表


空白管

測定管

樣本(μL


40

提取液(μL

40


顯色液(μL

20

20

H2OμL

140

140

充分混勻,25℃靜置30min

微量石英比色皿/96孔板,蒸餾水調(diào)零,測定660nm處吸光值A,分別記為A空白管和A測定管,△A=A測定管-A空白管??瞻坠苤灰鲆还?。

 

計(jì)算公式

 

a. 用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.1164x-0.012,R2 = 0.9958,x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/L),y為吸光值。

速效磷含量(mg/kg干重)=(△A+0.012÷ 0.1164×V÷W×V÷V樣總)

                     = 8.591×(△A+0.012÷W

V樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.04mL;V樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質(zhì)量,約0.05g

 

b.       96孔板測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.0582x-0.012,R2 = 0.9958,x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/L),y為吸光值。

 

速效磷含量(mg/kg干重)=(△A+0.012÷ 0.0582×V÷W×V÷V樣總)

                     = 17.182×(△A+0.012÷W

V樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.04mL;V樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質(zhì)量,約0.05g

 

注意事項(xiàng)

1.        配好的顯色液當(dāng)天用完,變藍(lán)則不能使用。

2.        Z低檢出限為0.2μg/mL。


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