土壤全磷含量試劑盒說明書
微量法100管/96樣
注 意 :正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
土壤全磷包括有機(jī)磷和無機(jī)磷,有機(jī)質(zhì)中的有機(jī)磷可受土壤微生物的分解,轉(zhuǎn)化為無機(jī)磷,可供植物吸收利用,土壤中磷素營養(yǎng)狀況影響作物的產(chǎn)量和質(zhì)量,而土壤的全磷主要來自土母質(zhì)和施用的肥料,反映了土壤潛在的供磷能力。
測定原理:
混合酸高溫消解土壤樣品,采用鉬銻抗比色法測定樣品中的磷含量。
自備實驗用品及儀器:
消解儀、消化管、天平、烘箱、100目篩、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、移液管、濃硫酸、高氯酸。
試劑組成和配制:
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1支,4℃避光保存。臨用前加0.2mL蒸餾水溶解。
試劑三:液體0.4mL×1支,4℃保存。
工作液:臨用前將試劑二和試劑三充分混勻,加19.4mL蒸餾水混勻。
樣本處理:
新鮮土樣風(fēng)干或50℃烘干,過100目篩,稱0.5g左右置于消化管中,加1mL蒸餾水潤濕樣品,再加10mL濃硫酸,搖勻后加入高氯酸0.2mL,輕輕搖勻,同時做兩個樣品空白管,置于消解儀上,消解參數(shù)設(shè)置為:100℃,10min;200℃,10min;350℃,20min;400℃,30min。消解結(jié)束后用蒸餾水定容至100mL,靜置后分別取1mL樣品空白及樣品消解液,分別加入0.5mL試劑一混勻作為待測樣品。
測定操作表:
空白管 | 測定管 | |
樣本(μL) | 20 | |
空白消解液(μL) | 20 | |
工作液(μL) | 180 | 180 |
充分混勻,25℃靜置30min | ||
于微量石英比色皿/96孔板,蒸餾水調(diào)零,測定700nm處吸光值A(chǔ),分別記為A空白管和A測定管,△A=A測定管-A空白管 |
注意:空白管只需測定一次。
計算公式:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 2.1476x -0.0011,R2 = 0.9983; (x為標(biāo)準(zhǔn)磷濃度,μmol/mL;y為吸光值A(chǔ))
全磷含量(g/kg)=(△A+0.0011)÷2.1476×V總÷W×10-3×31
= 1.443×(△A+0.0011)÷W
V總:加入提取液體積,100mL,W:樣本質(zhì)量,g
b. 用96孔板測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 1.0738x -0.0011,R2 = 0.9983;(x為標(biāo)準(zhǔn)磷濃度,μmol/mL;y為吸光值A(chǔ))
全磷含量(g/kg)=(△A+0.0011)÷ 1.0738×V總÷W×10-3×31
= 2.887×(△A+0.0011)÷W
V總:加入提取液體積,100mL,W:樣本質(zhì)量,g
注意事項:
1. 配好的試劑3天內(nèi)使用完。
2. Z低檢出限為10mg/Kg。
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