亚洲无码不卡永久免费,亚洲无码精品在线播放,国产在线精品第一区二区,日本高清一区二区三区欧美

您好!歡迎訪問優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司網站!
全國服務咨詢熱線:

15021281375

當前位置:首頁 > 資料下載 > 肝酯酶(Hepatic lipase,HL)試劑盒說明書

肝酯酶(Hepatic lipase,HL)試劑盒說明書

發(fā)布時間:2023/5/11      點擊次數:253

肝酯酶(Hepatic lipase,HL)試劑盒說明書

微量法100T/48S

 

 

       正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

肝酯酶是脂肪分解酶,在肝實質細胞中合成,存在于肝臟竇周間隙內皮細胞表面和竇周間隙腔面的肝細胞微絨毛表面,可促進脂蛋白中的膽固醇向類固醇激素轉化,血漿中的HL活性增高時,血漿中小顆??蓪е?/span>LDL水平升高,加速動脈粥樣硬化的發(fā)生。

 

測定原理:

肝酯酶水解α-乙酸萘酯產生α-萘酚,可與固藍B鹽形成紫紅色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內與肝酯酶活性成正相關。

 

自備實驗用品及儀器:

天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀微量石英比色皿/96孔板。

 

試劑組成和配制

試劑一:液體110mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體1mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體8mL×1瓶,4℃保存。

試劑四:液體1mL×1瓶,4℃避光保存。

 

樣品處理:

1.        組織:按照質量(g):試劑一體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL試劑一)加入試劑一,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清待測。

2.        細胞:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一)加入試劑一,冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清待測。

3.        血清:直接測定。

 

測定操作:


對照管

測定管

樣品(μL

20

20

試劑一(μL

90

80

試劑二(μL


10

混勻,30℃水浴10min

試劑三(μL

80

80

試劑四(μL

10

10

充分混勻,30℃靜置5min,于微量石英比色皿/96孔板,測定595nm處吸光值,記為A對照管和A測定管,△A=A測定管- A對照管

 

 

 

計算公式:

a.        用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線:y= 0.1519 x -0.1241,R2=0.9994

1.按照蛋白濃度計算

酶活性定義:每毫克蛋白每分鐘水解α-乙酸萘酯產生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。

HL活性(μmol /min/mg prot= △A+0.1241÷0.1519×V反總÷V×Cpr÷T

= 6.58×△A+0.1241÷Cpr

2.按照樣本質量計算

酶活性定義:每克組織每分鐘水解α-乙酸萘酯產生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。

HL活性(μmol /min/g 鮮重)= △A+0.1241÷0.1519×V反總÷W×V÷V樣總)÷T

= 6.58×△A+0.1241÷W

3.按照細胞數量計算

酶活性定義:104個細胞每分鐘水解α-乙酸萘酯產生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。

HL活性(μmol /min/104 cell= △A+0.1241÷0.1519×V反總÷V×細胞數量÷V樣總)÷T

                                      = 6.58×△A+0.1241÷細胞數量

4.按照液體體積計算

酶活性定義:每毫升血清每分鐘水解α-乙酸萘酯產生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。HL活性(μmol /min/mL=△A+0.1241÷0.1519×V反總÷V÷T

                                = 6.58×△A+0.1241

V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應體系中加入樣本體積,0.02mL;W:樣本質量,g;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,10min

 

b.用96孔板測定的計算公式如下

標準曲線:y= 0.076 x -0.1241R2=0.9994

1.按照蛋白濃度計算

酶活性定義:每毫克蛋白每分鐘水解α-乙酸萘酯產生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。

HL活性(μmol /min/mg prot= △A+0.1241÷0.076×V反總÷V×Cpr÷T

= 13.16×△A+0.1241÷Cpr

2.按照樣本質量計算

酶活性定義:每克組織每分鐘水解α-乙酸萘酯產生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。

HL活性(μmol /min/g 鮮重)= △A+0.1241÷0.076×V反總÷W×V÷V樣總)÷T

= 13.16×△A+0.1241÷W

3.按照細胞數量計算

酶活性定義:104個細胞每分鐘水解α-乙酸萘酯產生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。

HL活性(μmol /min/104 cell= △A+0.1241÷0.076×V反總÷V×細胞數量÷V樣總)÷T

                                      = 13.16×△A+0.1241÷細胞數量

4.按照液體體積計算

酶活性定義:每毫升血清每分鐘水解α-乙酸萘酯產生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。HL活性(μmol /min/mL=△A+0.1241÷0.076×V反總÷V÷T

                                = 13.16×△A+0.1241

V反總:反應總體積,0.2mLV樣:反應體系中加入樣本體積,0.02mL;W:樣本質量,g;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,10min


文件下載    圖片下載    
優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司
地址:金大公路8218號1幢
郵箱:1431486511@qq.com
傳真:
關注我們
歡迎您關注我們的微信公眾號了解更多信息:
歡迎您關注我們的微信公眾號
了解更多信息
定远县| 辛集市| 永康市| 新邵县| 桐柏县| 枣阳市| 内黄县| 烟台市| 高邑县| 萨迦县| 新郑市| 康保县| 南江县| 仪征市| 中卫市| 荣成市| 偏关县| 淳安县| 年辖:市辖区| 罗定市| 大港区| 调兵山市| 绵阳市| 玛曲县| 绵阳市| 平顶山市| 贵阳市| 融水| 温泉县| 潮州市| 新泰市| 娄烦县| 乌苏市| 延津县| 芮城县| 顺昌县| 类乌齐县| 江达县| 应用必备| 青岛市| 姚安县|