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血清低密度脂蛋白( LDL-C)試劑盒說明書

發(fā)布時(shí)間:2023/5/11      點(diǎn)擊次數(shù):259

血清低密度脂蛋白(Low density lipoprotein cholesterol , LDL-C)試劑盒說明書

微量法100/96



    意:正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義:

低密度脂蛋白血清蛋白之一,主要由肝臟合成,與冠心病的發(fā)生和動(dòng)脈粥樣硬化損傷呈正相關(guān),是脂類疾病分類和風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測的一個(gè)重要指標(biāo)。

 

測定原理:

用沉淀劑分離血清中的低密度脂蛋白膽固醇,利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸,從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC進(jìn)一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化,生成4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。

 

需自備的儀器和用品:

離心機(jī),恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

 

試劑組成和配制:

試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體15mL×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存。臨用前加5mL試劑四充分溶解。

試劑四:液體10mL×1瓶,4℃保存。

標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mL×1支,4℃保存。

 

樣品處理:

取血后3小時(shí)內(nèi)分離血清,將血清樣品與試劑一按照2:1的比例充分混勻,25℃靜置15min2000g離心15min,上清置于冰上待測。

 

測定操作表:

 


空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

測定管

蒸餾水(μL

4



標(biāo)準(zhǔn)品(μL


4


樣本(μL



4

試劑二(μL

150

150

150

試劑三(μL

50

50

50

混勻,37℃靜置30min,于1mL玻璃比色皿,空白管調(diào)零,測定500nm處吸光值A。分別記為A標(biāo)準(zhǔn)管和A測定管

 

計(jì)算公式:

a.   用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

LDL-C含量(mmol/L= A測定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管×C標(biāo)準(zhǔn)管

                     =5×A測定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管

C標(biāo)準(zhǔn)管:5mmol/L

 

b96孔板測定的計(jì)算公式如下

LDL-C含量(mmol/L= A測定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管×C標(biāo)準(zhǔn)管

                     =5×A測定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管

C標(biāo)準(zhǔn)管:5mmol/L

 

注意事項(xiàng):

1. 樣本切勿反復(fù)凍融,最好在取血后12小時(shí)內(nèi)完成測定。

2. 配置好的試劑三4℃保存可半個(gè)月。

3. 線性范圍為0.17mmol/L- 4.2mmol/L。


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