白介素從分子結(jié)構(gòu)來看,其都是小分子的多肽,多數(shù)由一百個左右氨基酸組成。白細(xì)胞介素都是通過與靶細(xì)胞表面的細(xì)胞因子受體特異性結(jié)合來發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng),這些效應(yīng)包括促進(jìn)靶細(xì)胞的增殖和分化,增強(qiáng)抗感染和殺傷腫瘤細(xì)胞效應(yīng),促進(jìn)或抑制其他細(xì)胞因子合成,促進(jìn)炎癥過程,影響細(xì)胞代謝等。
1、靈敏度:有二層含義,一為試劑檢出被檢物質(zhì)的低量的能力;二為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。
2、特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測物相近結(jié)構(gòu)部分的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng),使測定結(jié)果升高,可能導(dǎo)致假陽性,所以交叉反應(yīng)是評價其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。
3、精密度:一般指其批內(nèi)CV%,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍。
4、準(zhǔn)確度:通過添加回收實驗進(jìn)行評價。
5、安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
6、經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本,而市場價格比較合理。
白介素ELISA試劑盒的正確使用需要留意以下這些問題?
實驗時,要使底物避光保存。底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定十分鐘以上。待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。
用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置一分鐘,使清洗更加好。沒有洗板機(jī)時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
應(yīng)盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。