熒光PCR檢測(cè)試劑盒的實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR過(guò)程,然后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。它在熒光免疫分析中常用于標(biāo)記抗原或抗體,也可用于檢測(cè)微環(huán)境的微觀特征,如表面活性劑膠束、雙分子膜、蛋白質(zhì)活性位點(diǎn)等。一般要求探針具有大摩爾吸收系數(shù)和高熒光量子產(chǎn)率;熒光發(fā)射波長(zhǎng)為長(zhǎng)波,具有較大的斯托克斯位移;用于免疫測(cè)定時(shí),與抗原或抗體的結(jié)合不得影響其活性。
熒光PCR檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品特性介紹:
重復(fù)性好:擴(kuò)增曲線重合度高,受干擾影響少。
靈敏度高:能對(duì)低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng):采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制,抑制非特異性擴(kuò)增。
擴(kuò)增效率高:擴(kuò)增曲線Ct值低,起峰快,效率高。
熒光PCR檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法的局限性有什么?
1.樣品檢測(cè)結(jié)果與樣品采集、加工、運(yùn)輸和保存的質(zhì)量有關(guān);
2.如果在樣品提取過(guò)程中沒(méi)有很好地控制交叉污染,可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果;
3.陽(yáng)性對(duì)照和擴(kuò)增產(chǎn)物的泄漏將導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果;
4.病原體在流行過(guò)程中的基因突變和重組會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
5.不同的提取方法提取效率不同,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
6.試劑運(yùn)輸、儲(chǔ)存不當(dāng)或試劑制備不準(zhǔn)確導(dǎo)致試劑檢測(cè)效率下降、假陰性或定量檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確;
7.測(cè)試結(jié)果僅供參考。如果需要診斷,請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀和其他檢測(cè)方法。