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牛布魯氏桿菌PCR試劑盒

簡(jiǎn)要描述:牛布魯氏桿菌PCR試劑盒:牛布魯氏桿菌(Brucella bovis,又叫Brucella abortus)又叫流產(chǎn)布氏桿菌,是一種革蘭氏陰性的不運(yùn)動(dòng)細(xì)菌。

  • 更新時(shí)間:2024-07-17
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問(wèn)  量:272

詳細(xì)介紹

品牌YLKBIO貨號(hào)YLK10365P
規(guī)格50T供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研實(shí)驗(yàn)應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)
英文名稱Brucella Bovis PCR Kit保存條件低溫運(yùn)輸,-20℃保存
有效期12個(gè)月試劑盒說(shuō)明不同批號(hào)的試劑盒組分不可交互使用

牛布魯氏桿菌PCR試劑盒


商品名稱:牛布魯氏桿菌PCR試劑盒

Name     :Brucella Bovis PCR Kit

牛布魯氏桿菌(Brucella bovis,又叫Brucella abortus)又叫流產(chǎn)布氏桿菌,是一種革蘭氏陰性的不運(yùn)動(dòng)細(xì)菌,無(wú)莢膜(光滑型有微莢膜),觸酶、氧化酶陽(yáng)性絕對(duì)嗜氧菌,可還原硝酸鹽,細(xì)胞內(nèi)寄生,可以在牛體內(nèi)存活,也能引起人類疾病。一頭奶牛如果感染布魯氏桿菌,沒(méi)有得到及時(shí)的清潔和防疫,布病很快會(huì)在牲畜群體里暴發(fā),進(jìn)而增加人被感染的幾率。其特點(diǎn)是生殖器官、胎膜及多種器官組織發(fā)炎、壞死和肉芽腫的形成,引起流產(chǎn)、不孕、睪丸及關(guān)節(jié)炎等癥狀。感染人后可能導(dǎo)致多個(gè)器官或臟器系統(tǒng),骨骼或關(guān)節(jié)的病變,感染組織中可觀察到具有組織學(xué)特征的肉芽腫。晚期可能失去勞動(dòng)能力、臥床不起、出現(xiàn)神經(jīng)或精神病方面的癥狀。因此牛布魯氏菌的檢測(cè)具有重要的意義。本試劑盒根據(jù)PCR原理開(kāi)發(fā),它具有下列特點(diǎn):

1.   即開(kāi)即用,用戶只需要提供細(xì)菌DNA模板。

2.   引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增牛布魯氏桿菌。

3.   提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。

4.   PCR mix中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。

5.   本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次。

6.   本產(chǎn)品只能用于科研。

【試劑組成】

包裝規(guī)格

50T/盒

PCR MagicMix 3.0

1 mL(亮黃蓋)

超純水

1 mL(藍(lán)色)

牛布魯氏桿PCR引物混合液

100 μL(白蓋)

牛布魯氏桿菌PCR陽(yáng)性對(duì)照(1×10E8拷貝/ul)50 μL(黃蓋)
核酸釋放劑20次(1ml,綠蓋)
使用手冊(cè)1份

說(shuō)明:不同批號(hào)的試劑盒組分不可交互使用。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置,不要污染其他試劑。

【自備試劑】

樣品DNA。

【使用方法】

一、樣品DNA的制備

1.   如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?span>10μL陽(yáng)性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。

1.   用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)細(xì)菌DNA提取/試劑盒兼容。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免DNA提取的核酸釋放劑,本產(chǎn)品的裂解液可以直接作為PCR模板,省略了DNA提取步驟。其使用手冊(cè)可咨詢本公司客服索取。

二、設(shè)置PCR反應(yīng)(40 μL體系)

2.   對(duì)N+2個(gè)樣品,在PCR時(shí)需要增加一個(gè)PCR陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)PCR陰性對(duì)照,故需要設(shè)置N+4個(gè)反應(yīng)。在N+4個(gè)PCR管中分別加入下列成分:

成分

N+2個(gè)

樣品管

PCR陰性對(duì)照

PCR陽(yáng)性對(duì)照

PCR MagicMix 3.0

20 μL

20 μL

20 μL

牛布魯氏桿菌 PCR引物混合液

2 μL

2 μL

2 μL

N+2個(gè)樣品DNA模板

18 μL

-

-

PCR陰性對(duì)照

-

18 μL

-

PCR陽(yáng)性對(duì)照(用牛布魯氏菌PCR陽(yáng)性對(duì)照的10000倍稀釋液)

-

-

18 μL

3.  按下表設(shè)置PCR反應(yīng):

過(guò)程

溫度

時(shí)間

預(yù)變性

94℃

5 min

PCR反應(yīng)

35個(gè)循環(huán))

94℃

30 sec

55

30 sec

72

60 sec

最后延伸

72℃

10 min

三、電泳檢測(cè)

10-20 μL PCR產(chǎn)物。電泳檢測(cè)PCR產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的PCR Mix在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加loading buffer。預(yù)期的PCR產(chǎn)物長(zhǎng)度為450bp。陽(yáng)性對(duì)照必須有此條帶出現(xiàn),陰性對(duì)照必須無(wú)任何擴(kuò)增,否則實(shí)驗(yàn)無(wú)效。對(duì)沒(méi)有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋10倍后重復(fù)PCR擴(kuò)增以排除PCR抑制劑的感染。

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