簡要描述:L4440質(zhì)粒生長條件:LB +氨芐青霉/素,37℃(克隆菌株DH5α,2790bp)
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品牌 | YLKBIO | 貨號 | YLK-J3464h |
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規(guī)格 | 質(zhì)粒干粉 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 科研 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
感謝您選擇優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司提供的微生物菌種。本中心目前有標(biāo)準(zhǔn)菌種(斜面、甘油菌、穿刺菌和凍干粉四種形式)、基因工程菌種 (斜面、甘油菌和穿刺菌三種形式)、食用益生菌和工業(yè)發(fā)酵菌種,基本涵蓋了環(huán)境、工業(yè)、農(nóng)業(yè)、分析、食品、藥用真菌等各類生產(chǎn)和科研微生物。微生物總種類達(dá)到 2000 多種,并且該數(shù)量每天正在不斷增加。
菌種簡介:
產(chǎn)品名稱 | L4440質(zhì)粒 |
拉丁文名稱 | |
產(chǎn)品規(guī)格 | 質(zhì)粒干粉 |
L4440質(zhì)粒主要應(yīng)用 | 研究、教學(xué) |
菌種培養(yǎng)條件:
培養(yǎng)基名稱:酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
生長條件:LB +氨芐青霉/素,37℃(克隆菌株DH5α,2790bp)
存儲條件:2-8℃
安全等級:0
操作步驟:
1.溶解: 收到質(zhì)粒干粉后,請加入 20μl 無菌水至管底,溶解質(zhì)粒,室溫靜置 1min;
2.混合(吸附質(zhì)粒): 200μl 感受態(tài)細(xì)胞 + 質(zhì)粒 DNA 5~10µl 混勻,冰上放置 30min;
3.熱激導(dǎo)入: 42℃靜置 90s;
4.收縮膜孔: 冰浴 2min;
5.修復(fù)培養(yǎng): 毎管加 800µl LB 液體培養(yǎng)基,37 ℃培養(yǎng) 1h 150 r/min;
6.篩選培養(yǎng): 將適當(dāng)體積(100 µl)的復(fù)蘇細(xì)胞,涂布在相應(yīng)抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(瓊脂面務(wù)必干燥后), 倒置培養(yǎng) 12-16h,出現(xiàn)菌落。
7.提?。?挑取單克隆菌落至相應(yīng)抗性 LB 液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng) 12-16h,根據(jù)試驗需要提取質(zhì)粒。
提供形式:質(zhì)粒干粉
菌種培養(yǎng)注意事項:
1.微生物菌種應(yīng)保存于低溫、清潔和干燥的地方,室溫放置時間過長會導(dǎo)致菌種衰退;
2.菌種操作在無菌條件下進行,接種完畢應(yīng)該滅菌再做丟棄處理;
3.斜面菌種和穿刺菌種保存時間通常為 3-6 個月,應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時結(jié)轉(zhuǎn);凍干粉保存時間通常是 2-25 年;甘油菌保 存時間為 2-5 年;
4.凍干首-次活化,干粉要全部用完,不能保留。用0.2-0.5m1的培養(yǎng)液或者無菌水溶解,接種在1-2個平板上,因凍干菌種處于休眠狀態(tài),請勿接種多個平板,以免因接種量不足而導(dǎo)致復(fù)蘇不成功。
5.如果有不明白之處,應(yīng)先與我中心聯(lián)系,避免不必要的損失。
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