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人神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)檢測試劑盒

簡要描述:人神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)檢測試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)的含量。

  • 更新時間:2024-07-10
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問  量:216

詳細介紹

品牌YLKBIO貨號YLK-4044E
規(guī)格96T/48T供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研實驗應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)
樣本血清、血漿及相關(guān)液體樣本適用物種人、大鼠、小鼠、植物、動物等
檢測方法雙抗體夾心法保存條件2-8℃
有效期6個月

人神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)檢測試劑盒

                                                           (ELISA) 使用說明書

?人神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)檢測試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)的含量。

? 有效期:6個月

? 保存條件:2-8

? 本試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床診斷

實驗原理實驗

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并che底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

試劑盒組成

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需要而未提供的試劑和器材

1. 酶標儀(450nm

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

樣品收集、處理及保存方法

1)血清 操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后1000×g 離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2)血漿 EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g 離心 30 分鐘去除顆粒。

3)細胞上清液 1000×g 離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4)組織勻漿 將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g 離心 10 分鐘,取上清液

5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在 37或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

注:標本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

備注:

1. 標準品濃度依次為:80、40、20、10、5、2.5 U/L

2. 經(jīng)過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過最大標準品濃度時,可用樣本/稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。

試劑準備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按120稀釋,即120×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

操作步驟

1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4。

2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本 50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物 AB 50μL,37避光孵育 15min。

7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。

實驗結(jié)果計算

以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。

試劑盒性能

1. 檢測范圍:2.5 U/L – 80 U/L。

2. 靈敏度:Z低檢測濃度小于 0.1 U/L

3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于 10% ,板間變異系數(shù)小于 15% 。

注意事項

1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫 20-25。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響 OD 值。

4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產(chǎn)品。

10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

說明

由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風險。

1. 最終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當時的實驗環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準備充足的標本備份。

2. 不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。

3. 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到最佳的檢測結(jié)果。

4. 本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。

5. 使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA 實驗結(jié)果偏差。

6. 若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。

7. 某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。

相關(guān)產(chǎn)品

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小鼠免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒48T/96TMouse Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit
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