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當(dāng)前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 科研細(xì)胞 > 原代細(xì)胞 > 復(fù)蘇/凍存大鼠睪丸支持細(xì)胞

大鼠睪丸支持細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述:大鼠睪丸支持細(xì)胞睪丸是一種免疫豁免器官。睪丸支持細(xì)胞又稱(chēng)Sertoli細(xì)胞,是睪丸的主要組成細(xì)胞,在精子發(fā)生和成熟過(guò)程中,具有支持、保護(hù)和營(yíng)養(yǎng)生精細(xì)胞作用,可分泌雄激素結(jié)合蛋白、抑制素等,相鄰Sertoli細(xì)胞之間形成的緊密連結(jié)是構(gòu)成睪屏障的主要結(jié)構(gòu)。

  • 更新時(shí)間:2024-07-10
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問(wèn)  量:220

產(chǎn)品分類(lèi)

Product Category

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詳細(xì)介紹

品牌YLKBIO貨號(hào)YLK-XB1185h
規(guī)格5*10^5供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)
組織來(lái)源睪丸組織

大鼠睪丸支持細(xì)胞

產(chǎn)品名稱(chēng) :大鼠睪丸支持細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào) :YLK-XB1185h

組織來(lái)源 :睪丸組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡(jiǎn)介:

睪丸支持細(xì)胞分離自睪丸。睪丸支持細(xì)胞又稱(chēng)Sertoli細(xì)胞,在體內(nèi)呈不規(guī)則的 高錐體形,細(xì)胞基部附著在基膜上,頂部伸至曲精小管腔面。它是生精細(xì)胞的支架,為其提供必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),能合成與分泌雄激素結(jié)合蛋白,為其提供高濃度的雄激素環(huán)境等,還具有構(gòu)成血-睪屏障,形成睪丸內(nèi)微環(huán)境,調(diào)節(jié)精子發(fā)生等功能。

睪丸支持細(xì)胞是睪丸的主要組成細(xì)胞,能分泌多種生長(zhǎng)因子和免疫抑制因子,不僅可為精子提供營(yíng)養(yǎng)支持和免疫保護(hù),也能對(duì)其他細(xì)胞,如胰島和神經(jīng)細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)支持,而且當(dāng)其與胰島或神經(jīng)細(xì)胞共移植時(shí),也能夠?yàn)檫@些細(xì)胞提供免疫保護(hù),提高植活率。因此,睪丸支持細(xì)胞在細(xì)胞移植中具有廣泛的應(yīng)用前景。制備高活率的Sertoli不僅對(duì)Sertoli的基礎(chǔ)研究有重要價(jià)值,而且在精子發(fā)生等領(lǐng)域有重要意義。


細(xì)胞特性

1) 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常睪丸組織。

2) 細(xì)胞鑒定:GATA4或FasL或Vimentin免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。


質(zhì)量檢測(cè)

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等

換液頻率 :每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 :貼壁
細(xì)胞形態(tài) :成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 :可傳2-3代
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%


該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。


注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰/酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。

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