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當(dāng)前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 科研細(xì)胞 > 原代細(xì)胞 > 復(fù)蘇/凍存兔臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞

兔臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述:兔臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞是一種多能干細(xì)胞,是具有自我復(fù)制能力的多潛能細(xì)胞。在一定條件下,它可以分化成多種功能細(xì)胞。在胚胎發(fā)育中來(lái)源于中胚層。

  • 更新時(shí)間:2024-07-10
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問(wèn)  量:162

產(chǎn)品分類(lèi)

Product Category

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詳細(xì)介紹

品牌YLKBIO貨號(hào)YLK-XB1022h
規(guī)格5*10^5供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)
組織來(lái)源 臍帶組織

兔臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞

產(chǎn)品名稱(chēng) :兔臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào) :YLK-XB1022h

組織來(lái)源 : 臍帶組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡(jiǎn)介:

臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離自臍帶;臍帶是哺乳類(lèi)的連接胎兒和胎盤(pán)的管狀結(jié)構(gòu)。原來(lái)是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長(zhǎng)部而形成的。臍帶中通過(guò)尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。當(dāng)卵黃囊及其血管退化,臍動(dòng)脈和臍靜脈就發(fā)達(dá)起來(lái),在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質(zhì)。在子宮中,子宮動(dòng)脈在胎盤(pán)的母體部分出的毛細(xì)血管,與胎盤(pán)的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行 C O 2 和 O 2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。

臍動(dòng)脈將胎兒來(lái)的廢物運(yùn)送至胎盤(pán),臍靜脈將 O 2 和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤(pán)運(yùn)送給胎兒。后由子宮靜脈將來(lái)自胎兒的代謝廢物運(yùn)走,某種激素和抗體等也通過(guò)臍帶從母體移交給胎兒。臍帶中含有大量的干細(xì)胞,干細(xì)胞是生命的種子,它會(huì)分化成機(jī)體的各種細(xì)胞,結(jié)出各種不同的果實(shí)——血液細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、骨骼細(xì)胞等。干細(xì)胞是具有自我更新、高度增殖和多項(xiàng)分化潛能的細(xì)胞群體;這些細(xì)胞可以通過(guò)分裂維持自身細(xì)胞的特性和數(shù)量,又可進(jìn)一步分化為各種組織細(xì)胞,從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。

間充質(zhì)干細(xì)胞(M SC )是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞。在不同的誘導(dǎo)條件下,可分化為多種造血細(xì)胞以外的組織細(xì)胞,并具有造血支持、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等作用;目前,多用于風(fēng)濕免疫疾病的治療。間充質(zhì)干細(xì)胞(M SC s)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞,存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細(xì)胞因子及生長(zhǎng)因子,促進(jìn)造血干細(xì)胞(HSC )的增殖與分化。M SC s 還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和組織修復(fù)作用,可減輕移植物抗宿主病(G V HD )及其他移植相關(guān)并發(fā)癥 。


細(xì)胞特性

1) 細(xì)胞來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常臍帶組織。

2) 細(xì)胞鑒定:CD44免疫熒光染色為陽(yáng)性

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭狀細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。


質(zhì)量檢測(cè)

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 : 含 FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin 等
換液頻率 : 每 2-3 天換液一次
生長(zhǎng)特性 : 貼壁
細(xì)胞形態(tài) : 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 : 可傳 3-5 代左右
傳代比例 : 1:2
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%


該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶(hù)收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴(lài)氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。


注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰/酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。

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