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當前位置:首頁 > 產品中心 > 科研細胞 > 原代細胞 > 復蘇/凍存小鼠滑膜成纖維細胞

小鼠滑膜成纖維細胞

簡要描述:小鼠滑膜成纖維細胞滑膜是關節(jié)囊的內層,淡紅色,平滑閃光,薄而柔潤,由疏松結締組織組成。關節(jié)腔內的所有結構,除關節(jié)軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過關節(jié)腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹。

  • 更新時間:2024-07-10
  • 廠商性質:生產廠家
  • 生產地址:上海
  • 訪  問  量:152

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詳細介紹

品牌YLKBIO貨號YLK-XB0960h
規(guī)格5*10^5供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應用領域化工,生物產業(yè)
組織來源滑膜組織

小鼠滑膜成纖維細胞

產品名稱 :小鼠滑膜成纖維細胞

產品貨號 :YLK-XB0960h

組織來源 :滑膜組織

產品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

滑膜成纖維細胞分離自滑膜組織?;そM織是位于關節(jié)腔內面的內襯結構,各種關節(jié)內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節(jié)正常功能的重要組織結構,同時在各種關節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關節(jié)炎(O A ) 以關節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?,其病理改變累及關節(jié)的各個組成部分,但絕不僅局限于軟骨,還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,共同加速關節(jié)的退變?;ぜ毎菢嫵苫拥淖畲蠹毎后w,是維持關節(jié)正常功能的重要組織結構,它包埋在顆粒狀無定性的基質中,基質內有分散的纖維分布?;び葾 型(巨噬樣滑膜細胞) 、B 型(成纖維樣滑膜細胞) 以及C 型(樹突細胞樣滑膜細胞) 細胞組成。

滑膜細胞主要功能:
① 滑膜細胞產生潤滑液成分,并且與關節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關。
② 滑膜細胞增生,表現(xiàn)為不依賴于支持物生長,并且分泌大量的效應分子來促進炎癥和關節(jié)損壞。
③ 是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡中效應因子的一部分。


細胞特性

1)細胞來源于實驗動物正常關節(jié)組織。
2)細胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:成纖維樣細胞,貼壁培養(yǎng)。


質量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳1-2代左右
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相:空氣,95% 。C O2,5%


該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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