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當前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 科研細胞 > 原代細胞 > 復(fù)蘇/凍存小鼠棕色脂肪細胞

小鼠棕色脂肪細胞

簡要描述:小鼠棕色脂肪細胞分離自棕色脂肪組織。動物體內(nèi)存在棕色和白色兩種脂肪,白色脂肪堆積在皮下,負責(zé)儲存多余熱量。

  • 更新時間:2024-07-10
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問  量:165

產(chǎn)品分類

Product Category

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詳細介紹

品牌YLKBIO貨號YLK-XB0912h
規(guī)格5*10^5供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)
組織來源脂肪組織

小鼠棕色脂肪細胞

產(chǎn)品名稱 :小鼠棕色脂肪細胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB0912h

組織來源 :脂肪組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

棕色脂肪細胞分離自棕色脂肪組織。動物體內(nèi)存在棕色和白色兩種脂肪,白色脂肪堆積在皮下,負責(zé)儲存多余熱量。棕色脂肪負責(zé)分解引發(fā)肥胖的白色脂肪,將后者轉(zhuǎn)化成二氧化碳、水和熱量,本身不儲存熱量。棕色脂肪組織呈棕色,其特點是組織中有豐富的毛細血管,脂肪細胞內(nèi)散著許多小脂滴,線粒體大而豐富,核圓形,位于細胞中央,這種脂肪細胞也稱為多泡脂肪細胞。棕色脂肪組織在成年動物極少,新生兒及冬眠動物較多,在新生兒主要分布在肩胛間區(qū)、腋窩及頸后部等處。棕色脂肪組織僅在嬰兒時期發(fā)揮作用,它們堆積在新生兒肩胛處,幫助維持體溫。隨著年齡增長,棕色脂肪會逐漸消失。

最終,動物體內(nèi)只殘存少量棕色脂肪細胞,分布于頸部和鎖骨。脂肪細胞分為白色脂肪細胞和褐色(棕色) 脂肪細胞,常呈白色,在嬰幼兒期大量增殖,到青春期數(shù)量達到dian峰,此后數(shù)量一般不再增加。細胞內(nèi)含有大量富含脂肪的小泡,稱為脂質(zhì)泡,富含光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。此外,還有一種褐色脂肪細胞,在動物體內(nèi)主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍,含有高度團縮的褐色脂肪,作用是將脂質(zhì)分解產(chǎn)熱,調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)比例。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :梭形、多角形
傳代特性 :屬于終末分化細胞。屬于不增殖細胞群
傳代比例 :不傳代
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶

培養(yǎng)條件 :氣相:空氣,95% 。C O2,5%


該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。


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