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當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 科研細(xì)胞 > 原代細(xì)胞 > 復(fù)蘇/凍存人肺癌成纖維細(xì)胞

人肺癌成纖維細(xì)胞

簡要描述:人肺癌成纖維細(xì)胞分離自肺癌組織;肺癌是最常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤,絕大多數(shù)肺癌起源于支氣管粘膜上皮,故亦稱支氣管肺癌。肺癌可向四周乃至全身擴(kuò)散。肺癌發(fā)病率和死亡率增長最快,對人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。

  • 更新時(shí)間:2024-07-09
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問  量:154

產(chǎn)品分類

Product Category

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詳細(xì)介紹

品牌ATCC貨號(hào)YLK-XB0709h
規(guī)格5*10^5供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)
組織來源肺癌組織

人肺癌成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品名稱 :人肺癌成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào) :YLK-XB0709h

組織來源 :肺癌組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡介:

肺癌成纖維細(xì)胞分離自肺癌組織;肺癌是最常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤,絕大多數(shù)肺癌起源于支氣管粘膜上皮,故亦稱支氣管肺癌。肺癌可向四周乃至全身擴(kuò)散。肺癌發(fā)病率和死亡率增長最快,對人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。

近50年來許多國家都報(bào)道肺癌的發(fā)病率和死亡率均明顯增高,男性肺癌發(fā)病率和死亡率均占所有惡性腫瘤的di一位,女性發(fā)病率占第二位,死亡率占第二位。肺癌的病因至今尚不wan全明確,大量資料表明,長期大量吸煙與肺癌的發(fā)生有非常密切的關(guān)系。肺癌,其實(shí)不是一種病,而是幾十種病的組合,有多種亞型,多種特性;根據(jù)肺癌細(xì)胞在顯微鏡下的形態(tài)特點(diǎn),可以初步分為兩種類型:小細(xì)胞肺癌(SC LC )15% 和非小細(xì)胞肺癌(N SC LC )85% 。

這兩種類型肺癌的生長特點(diǎn)、擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)和治療方案均不相同。絕大多數(shù)肺癌是非小細(xì)胞肺癌,約占85% 。它又能進(jìn)一步被分為三類,分別是:腺癌,鱗癌和大細(xì)胞癌。其中腺癌是最主要的類型,約占非小細(xì)胞肺癌中的50% 。如果是不吸煙的女性患者,幾乎全部都是腺癌。人肺癌成纖維細(xì)胞是肺癌組織中的癌相關(guān)成纖維細(xì)胞,癌相關(guān)成纖維細(xì)胞(cancer associated fibroblast,C A F)在腫瘤微環(huán)境中的重要作用已受到廣泛的重視。該細(xì)胞通過與癌細(xì)胞的直接接觸、分泌多種因子以及對腫瘤基質(zhì)的改造,促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移甚至耐藥性的發(fā)生。隨著研究的深入,有人提出C A F可能成為抗腫瘤/治療的新靶點(diǎn)。然而C A F的分化來源多樣,相應(yīng)的形態(tài)和功能各異,因此深入了解C A F的分化來源有利于更全面地認(rèn)識(shí)腫瘤發(fā)展的機(jī)制,為臨床治療提供理論依據(jù),體外培養(yǎng)肺癌成纖維細(xì)胞對肺癌研究有重要意義。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 : 貼壁不包被
培 養(yǎng)  基 : 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 貼壁
細(xì)胞形態(tài) : 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 : 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 : 1:2
消 化  液 : 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%


客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決

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