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人宮頸癌成纖維細(xì)胞

簡要描述:人宮頸癌成纖維細(xì)胞分離自患有宮頸癌病人的宮頸癌組織;宮頸癌也稱子宮頸癌,指發(fā)生在子宮陰道部及宮頸管的惡性腫瘤,是女性常見惡性腫瘤之一,發(fā)病率位于女性腫瘤的第二位。

  • 更新時間:2024-07-09
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問  量:164

產(chǎn)品分類

Product Category

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詳細(xì)介紹

品牌ATCC貨號YLK-XB0688h
規(guī)格5*10^5供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)
組織來源宮頸癌組織

人宮頸癌成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品名稱 :人宮頸癌成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB0688h

組織來源 :宮頸癌組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡介:

宮頸癌組織源成纖維細(xì)胞分離自患有宮頸癌病人的宮頸癌組織;宮頸癌也稱子宮頸癌,指發(fā)生在子宮陰道部及宮頸管的惡性腫瘤,是女性常見惡性腫瘤之一,發(fā)病率位于女性腫瘤的第二位。宮頸癌可向鄰近組織和器官直接蔓延,向下至陰道穹窿及陰道壁,向上可侵犯子宮體,向兩側(cè)可侵犯盆腔組織,向前可侵犯膀胱,向后可侵犯直腸。也可通過淋巴管轉(zhuǎn)移至宮頸旁、髂內(nèi)、髂外、腹股溝淋巴結(jié),晚期甚至可轉(zhuǎn)移到鎖骨上及全身其他淋巴結(jié)。血行轉(zhuǎn)移比較少見,常見的轉(zhuǎn)移部位是肺、肝及骨。腫瘤微環(huán)境即腫瘤細(xì)胞生存的外部環(huán)境,由不同種類的非腫瘤性的細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)(E xtracellularm atrix,EC M )構(gòu)成,包括纖維細(xì)胞,免疫細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞,間充質(zhì)干細(xì)胞等,腫瘤細(xì)胞通過調(diào)控這些間質(zhì)細(xì)胞,創(chuàng)造出有利于自身侵襲轉(zhuǎn)移的條件,從而使得腫瘤得到進(jìn)展。

越來越多的證據(jù)表明,腫瘤微環(huán)境的改變在腫瘤進(jìn)展中扮演著重要的角色。在腫瘤微環(huán)境中,研究最多也是最主要的間質(zhì)細(xì)胞是腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(can cer-asso ciated fibrobla sts,C A Fs)。C A Fs主要由腫瘤周邊的正常成纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞演化而來。宮頸癌組織源成纖維細(xì)胞多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。剛分離的宮頸癌組織源成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁wan全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng)  基 : 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 貼壁
細(xì)胞形態(tài) : 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 : 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 : 1:2
消 化  液 : 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%


客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實驗

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決

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