簡要描述:牛結節(jié)性皮膚病間接ELISA抗體檢測試劑盒基于間接 ELISA 法,用于檢測牛血清中牛結節(jié)性皮膚病病毒抗體。
詳細介紹
品牌 | YLKBIO | 貨號 | YLK-1029E |
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規(guī)格 | 192 孔/盒 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 科研 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
牛結節(jié)性皮膚病間接ELISA抗體檢測試劑盒
僅供科研
牛結節(jié)性皮膚?。↙umpy skin disease,LSD)是由牛結節(jié)性皮膚病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)引起的一種急性或亞急性傳染病,使病畜全身被結節(jié)覆蓋,甚至引發(fā)死亡。其暴發(fā)會對牛養(yǎng)殖國家造成嚴重的經(jīng)濟損失。因此,快速檢測出感染牛,對于預防病毒擴散和控制疾病傳播至關重要。
在反應板微孔中包被牛結節(jié)性皮膚病病毒特異性抗原,待檢血清中的特異性抗體與包被抗原特異性結合,形成抗原抗體復合物。加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的抗牛 IgG 抗體,與微孔中的抗原抗體復合物結合。加入 TMB 顯色底物后,微孔中結合的 HRP 催化底物反應呈藍色。顏色反應的深淺與樣品中存在的抗牛結節(jié)性皮膚病病毒特異性抗體的量成正比。
組分名稱 | 含量 |
包被板 | 2*96 |
酶結合物工作液 | 25 mL |
陽性對照 | 2 mL |
陰性對照 | 2 mL |
樣品稀釋液 | 50 mL |
濃縮洗液 10× | 60 mL |
底物 A 液 | 12 mL |
底物 B 液 | 12 mL |
終止液 | 12 mL |
封板膜 | 2 張 |
血清稀釋板 | 2*96 |
說明書 | 1 份 |
【儲存條件及有效期】
本試劑盒的儲存溫度為 2-8°C 。有效期 12 個月。
微量可調(diào)移液器及配套槍頭 恒溫培養(yǎng)箱、計時器、記號筆
酶標儀(含波長 450nm 的濾光片) 去離子水或蒸餾水
洗板機(可選)
洗液 1×:使用前,濃縮洗液應恢復至室溫(20~25℃),并搖動,使沉淀溶解(最好在 37℃恒溫培養(yǎng)箱中加熱 5~10 min), 然后用蒸餾水作 10 倍稀釋(例如:60 mL 的濃縮洗滌液加上 540 mL蒸餾水)混勻,稀釋好的洗液 2~8℃可存放 7 日。
1. 準備:所有試劑在使用前應先恢復至 15~25℃,通過渦旋振蕩器輕振所有試劑混勻;
2. 取出密封的抗原包被板,沿包裝袋切口處撕開,記錄樣品位置;
3. 待檢樣品稀釋:將待檢樣品用樣品稀釋液按 1:50 倍稀釋(196
µL 樣品稀釋液中加 4 µL 待檢血清樣品),陰陽性對照不用稀釋;
4. 在 ELISA 包被板上:加入稀釋好的樣品,100µL/孔,陽性對照血清加 2 孔,100µL/孔;陰性對照血清加 2 孔,100µL/孔; 貼上封板膜;
5. 置 37℃恒溫箱中避光孵育 30 min;
6. 小心取掉封板膜,棄去孔中液體。每孔加約 300μL 洗液 1×, 靜置 1min 后,棄去洗滌液。洗滌 4 次,最后一次拍干。洗板間隔應避免微孔干燥后在吸水紙上拍干;
7. 在所有孔內(nèi)加入 100μL 的酶結合物工作液;
8. 置 37℃恒溫箱中避光孵育 30 min;
9. 小心取掉封板膜,棄去孔中液體。洗滌 4 次,方法同 6;
10. 將底物 A 液與底物 B 液按 1:1 混合,加入孔中,100 µL/ 孔, 貼上封板膜;
11. 置 37℃恒溫箱中避光孵育 10 min;
12. 每孔加入 50μL 終止液,振蕩混勻,5min 內(nèi)在酶標儀 450nm 讀數(shù)。
1. 所有實驗過程應遵守農(nóng)業(yè)農(nóng)村部關于牛結節(jié)性皮膚病檢測相關的規(guī)定。
2. 牛結節(jié)性皮膚病間接ELISA抗體檢測試劑盒僅用于體外診斷使用,應2~8℃冷藏運輸。
3. 所有的試劑在使用前應先恢復至18~25℃,用渦旋振蕩器振蕩混勻。
4. 濃縮洗液10×在低溫條件下會產(chǎn)生結晶,使用前要溫育使其溶解。
5. 注意防止試劑盒成分的污染,不同批次試劑盒成分不要混用, 不要使用超過有效期的試劑,未用完的反應板條應加干燥劑密封,連同未使用完試劑放回2~8℃保存。
6. 待檢血清數(shù)量較多時,應先稀釋完所有待檢血清,再加到反應板上, 使反應時間一致。
7. 底物 A 液和底物 B 液對強光和氧化劑敏感,應避光保存,防止氧化劑污染,對皮膚有刺激性。
8. 樣品稀釋液、對照血清與酶標抗體中含有微量防腐劑,應防止與皮膚接觸。
9. 試驗廢料、廢水等應做無害化處理,以免污染環(huán)境。
10. 嚴格遵守這些條款可以獲得理想的結果,特別是液體用量、作用時間和溫度必須準確。
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