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百日咳桿菌(BP)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)

簡要描述:百日咳桿菌(BP)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)適用于檢測氣管分泌物拭子、肺組織等樣本中的百日咳桿菌,用于百日咳桿菌感染的輔助診斷,其檢測結(jié)果僅供參考。

  • 更新時間:2024-06-26
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問  量:1079

詳細介紹

品牌YLKBIOCAS/
分子式/純度100
分子量/貨號YLK10230P
規(guī)格50T供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)

百日咳桿菌(BP)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:百日咳桿菌(BP)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)

Name:Bacillus pertussis (BP) nucleic acid detection kit (fluorescent PCR method)

【包裝規(guī)格】50T/盒

【預期用途】

本試劑盒適用于檢測氣管分泌物拭子、肺組織等樣本中的百日咳桿菌,用于百日咳桿菌感染的輔助診斷,其檢測結(jié)果僅供參考。

【檢驗原理】

本試劑盒采用 TaqMan 探針法實時熒光 PCR 技術(shù),設(shè)計一對百日咳桿菌特異性引物,結(jié)合一條特異

性探針,用熒光 PCR 技術(shù)對百日咳桿菌的 DNA 進行體外擴增檢測,用于臨床上對可疑感染者的病原學

診斷。

【試劑組成】

名 稱

50T/盒

反應(yīng)液

500μL×2 管

酶液

50μL×1 管

陽性質(zhì)控品

50μL ×1 管

陰性質(zhì)控品

250μL ×1 管

說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融次數(shù)不超過 5 次,有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

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百日咳桿菌為卵圓形短小桿菌,大小為0.5~1.5×0.2~0.5um,屬鮑特氏菌屬Bordetella),無鞭毛、芽胞。革蘭氏染色陰性。用甲苯胺藍染色可見兩極異染顆粒。專性需氧,初次分離培養(yǎng)時營養(yǎng)要求較高,需用馬鈴薯血液甘油瓊脂培養(yǎng)基(即鮑~金氏培養(yǎng)基)才能生長。經(jīng)37℃2~3天培養(yǎng)后,可見細小、圓形、光滑、凸起、銀灰色、不透明的菌落,周圍有模糊的溶血環(huán)。液體培養(yǎng)呈均勻混濁生長,并有少量粘性沉淀。


PCR技術(shù),即聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是由美國PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年獲諾貝爾化學獎)建立的。這項技術(shù)可在試管內(nèi)的經(jīng)數(shù)小時反應(yīng)就將特定的DNA片段擴增數(shù)百萬倍,這種迅速獲取大量單一核酸片段的技術(shù)在分子生物學研究中具有舉足輕重的意義,極大地推動了生命科學的研究進展。它不僅是DNA分析常用的技術(shù),而且在DNA重組與表達、基因結(jié)構(gòu)分析和功能檢測中具有重要的應(yīng)用價值。

PCR可以被認為是與發(fā)生在細胞內(nèi)的DNA復制過程相似的技術(shù),其結(jié)果都是以原來的DNA為模板產(chǎn)生新的互補DNA片段。細胞中DNA的復制是一個非常復雜的過程。參與復制的有多種因素。PCR是在試管中進行的DNA復制反應(yīng),基本原理與細胞內(nèi)DNA復制相似,但反應(yīng)體系相對較簡單。

PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)做準備;

②模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合;

③引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板DNA 鏈互補的半保留復制鏈。

重復循環(huán)變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復制鏈",而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2~4分鐘, 2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。

 

【注意事項】

1.所有操作嚴格按照說明書進行;

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,*混勻并短暫離心;

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存;

4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,以免交叉污染;

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待,并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理。

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