土壤有效硅試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法100T/96S
注 意 :正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
硅元素是一種十分重要的植物營(yíng)養(yǎng)元素,土壤中有效硅含量影響著植物的光合作用、呼吸作用以及對(duì)逆境的抗性。
測(cè)定原理:
硅酸根與鉬酸銨在弱酸條件下生成硅鉬酸,可被還原劑還原成硅鉬藍(lán),在700nm有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、常溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀。
試劑組成和配制:
提取液:液體105mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體4mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體4mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體4mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加入4mL試劑四溶劑充分溶解。
試劑四溶劑:液體4mL×1瓶,4℃保存。
樣本處理:
新鮮土樣風(fēng)干,過(guò)20目篩,按照土壤質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5的比例(建議稱(chēng)取約0.2g土樣,加入1mL提取液),振蕩提取1h,10000g ,25℃離心10min,取上清液待測(cè)。
測(cè)定操作表:
空白管 | 測(cè)定管 | |
樣本(μL) | 40 | |
提取液(μL) | 40 | |
試劑一(μL) | 40 | 40 |
混勻,35℃,15min | ||
試劑二(μL) | 40 | 40 |
混勻,25℃,10min | ||
試劑三(μL) | 40 | 40 |
試劑四(μL) | 40 | 40 |
充分混勻,25℃靜置30min | ||
于微量石英比色皿/96孔板,蒸餾水調(diào)零,測(cè)定700nm處吸光值A,分別記為A空白管和A測(cè)定管,△A=A測(cè)定管-A空白管 |
計(jì)算公式:
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):y = 0.0933x -0.0523,R2 = 0.9992
有效硅含量(mg/kg)=(△A+0.0523)÷ 0.0933×V反總÷(W×V樣÷V樣總)
= 53.6×(△A+0.0523)÷W
V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.04mL;V樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質(zhì)量,g
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):y = 0.0467x -0.0523,R2 = 0.9992
有效硅含量(mg/kg)=(△A+0.0523)÷ 0.0467×V反總÷(W×V樣÷V樣總)
= 107.2×(△A+0.0523)÷W
V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.04mL;V樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質(zhì)量,g
電話(huà)
微信掃一掃