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土壤無(wú)機(jī)磷(S-PHOS)含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)

發(fā)布時(shí)間:2023/10/9      點(diǎn)擊次數(shù):305

土壤無(wú)機(jī)磷S-PHOS含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)

                                              微量法100T/96S

 

   :正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義:  

磷是植物必需大量元素。植物主要通過(guò)根系從土壤中獲取磷元素。土壤磷包括有機(jī)磷和無(wú)機(jī)磷。土壤有機(jī)磷經(jīng)過(guò)礦化分解而轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)磷,才能進(jìn)一步被植物吸收利用。

 

測(cè)定原理:

從土壤中提取無(wú)機(jī)磷,在酸性環(huán)境中,通過(guò)鉬藍(lán)法定磷,即可計(jì)算出無(wú)機(jī)磷含量。

 

自備儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式水浴鍋,分析天平、可調(diào)式移液器、蒸餾水和100目篩子。

 

試劑組成和配制:

提取液:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前配制,加入8mL蒸餾水,充分溶解后加入4mL試劑二,混勻。

標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1支,20μmol/L無(wú)機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。

 

土壤無(wú)機(jī)磷提?。?/span>

10mL離心管,加入精確稱(chēng)取的100目篩子過(guò)篩的風(fēng)干土樣約0.01g,加入1mL提取液,震蕩混勻,然后置于40℃水浴浸提1h,8000g25,離心10min,取上清液,待測(cè)。

 

測(cè)定步驟:

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到660 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 打開(kāi)水浴鍋,調(diào)節(jié)溫度到40℃。

3. 空白管:EP管,依次加入100μL蒸餾水,100μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度,記為A空白管。

4. 標(biāo)準(zhǔn)管:EP管,依次加入10μL標(biāo)準(zhǔn)液,90μL蒸餾水,100μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

5. 測(cè)定管:EP管,依次加入10μL上清液,90μL蒸餾水,100μL試劑三,混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。

需在40min內(nèi)完成比色。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

 

土壤無(wú)機(jī)磷含量計(jì)算公式:

a.使用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

S-PHOSμmol /g 干重)=[C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定-A空白)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)]×V總÷W

                    

 =0.02×(A測(cè)定-A空白)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)÷W

C標(biāo)準(zhǔn)液:20 μmol/L;V總:總上清液體積,1 mL=0.001 L;W:土壤樣品質(zhì)量,g

 

b.使用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

S-PHOSμmol /g干重)=[C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定-A空白)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)]×V總÷W

                      =0.02×(A測(cè)定-A空白)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)÷W

C標(biāo)準(zhǔn)液:20 μmol/L;V總:總上清液體積,1 mL=0.001 L;W:土壤樣品質(zhì)量,g。

 

注意事項(xiàng):

1.        試劑三需臨用前配制,限當(dāng)天使用。試劑三配制過(guò)程中,可能會(huì)產(chǎn)生黑色固體,其不影響結(jié)果,注意吸取時(shí)不要將黑色固體吸入。

2.        40min內(nèi)完成比色。


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