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土壤全鐵試劑盒說(shuō)明書

發(fā)布時(shí)間:2023/10/7      點(diǎn)擊次數(shù):251

土壤全鐵試劑盒說(shuō)明書

微量法100T/96S

 

 

   正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義:

鐵元素是一種十分重要的植物營(yíng)養(yǎng)元素,土壤中鐵含量直接影響著植物吸收利用以及生長(zhǎng)代謝。

 

測(cè)定原理:

pH2-9范圍內(nèi),鹽酸羥胺將三價(jià)鐵轉(zhuǎn)化為二價(jià)鐵,與鄰菲羅琳反應(yīng)生成橙紅色配合物,在510nm有特征吸收峰。

 

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。

 

試劑組成和配制:

提取劑:粉劑×1瓶,4℃保存。

提取液:液體100mL×4瓶,4℃保存。

試劑一:液體2mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體6mL×1瓶,4℃保存。

試劑三:液體4mL×1瓶,4℃避光保存。

 

樣本處理:

新鮮土樣風(fēng)干,過(guò)100目篩,按照土壤質(zhì)量(g):提取劑質(zhì)量(g)14的比例(建議稱取約0.1g土樣,加入0.4g提取劑)緩慢加入提取劑于坩堝中,邊加邊攪拌均勻,然后在馬弗爐中550℃熔融10min,然后在920℃熔融30min,趁熱取出坩堝,將熔融物轉(zhuǎn)入燒杯,邊攪拌邊加4mL提取液,必要時(shí)加蓋,從燒杯口加入,防止溶液濺出,溶解30min后,5000g ,25℃離心10min,取上清液待測(cè)。

 

測(cè)定操作表:

 


空白管

測(cè)定管

樣本(μL


20

試劑一(μL

20

20

試劑二(μL

60

60

試劑三(μL

40

40

H2OμL

80

60

充分混勻,25℃靜置20min

微量石英比色皿/96孔板,蒸餾水調(diào)零,測(cè)定510nm處吸光值A,分別記為A空白管和A測(cè)定管,△A=A測(cè)定管-A空白管

 

 

計(jì)算公式

a.        用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.1569x -0.0173,R2 = 0.9992

全鐵含量(mg/kg=(△A+0.0173÷ 0.1569×V反總÷W×V÷V樣總)

                 = 254.94×(△A+0.0173÷W

V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,4mL,W:樣本質(zhì)量,g

 

b.       96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.0785x -0.0173,R2 = 0.9992

全鐵含量(mg/kg=(△A+0.0173÷ 0.0785×V反總÷W×V÷V樣總)

                 = 509.55×(△A+0.0173÷W

V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,4mL,W:樣本質(zhì)量,g


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