核酸染料對(duì)動(dòng)物和人的毒性由多方面決定。
一是染料的膜通透性。EB 被歸類(lèi)為強(qiáng)誘變劑是由于其分子量較小,容易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。而 EB 二聚體 Ethidium Homodimer(EthD)嵌入 DNA 的能力比 EB 強(qiáng)上千倍,但毒性很小,就是由于其分子比 EB 大,不能透過(guò)細(xì)胞膜,所以毒性反而更低。SYBR 系列染料雖然低毒,但由于一般都溶于 DMSO(因?yàn)槿菀姿?,不能使用水溶液做溶劑?中,所以如果濺到皮膚表面,更容易進(jìn)入皮膚。
二是染料是否容易被人體降解。比如 EB 在體外就很難降解,一旦進(jìn)入體內(nèi)能在人體內(nèi)殘留的時(shí)間可能比較長(zhǎng),增加了毒性;而 SYBR Green I 等染料(也能以嵌入方式與 DNA 結(jié)合)由于不穩(wěn)定,比較容易自然降解,所以毒性自然較低。
三是降解產(chǎn)物是否有毒性。比如用很多方法(如強(qiáng)堿法)降解 EB 得到的產(chǎn)物有的比 EB 毒性更大,而有的染料降解產(chǎn)物毒性卻低很多,甚至無(wú)毒。
四是染料進(jìn)入細(xì)胞核以后是否能跟 DNA 結(jié)合。很多實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示即使 EB染料也很難嵌入型到染色體中,因?yàn)槿旧w的 DNA 已緊密地與組蛋白結(jié)合。五是染料與 DNA 的結(jié)合方式。如果是嵌入式結(jié)合(如 EB 染料),則容易在DNA 復(fù)制時(shí)引起突變;如果是附著式結(jié)合(本產(chǎn)品),則不容易引起突變。 六是細(xì)胞修復(fù)突變的能力。正常人體都有很強(qiáng)的修復(fù)突變的能力,如修復(fù)日光中 UV 誘導(dǎo)的 DNA 突變??傊?,一種 DNA 染料的毒性強(qiáng)弱是多種因素綜合的結(jié)果。
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